一、用途及原理
该培养基专门用于创伤弧菌的选择性分离培养。通过提供蛋白胨和䏡胨等基本营养成分,确保细菌的生长条件。此外,培养基中稍高含量的氯化钠、氯化镁和氯化钾能够模拟海水的渗透压,有助于弧菌的良好生长。培养基中添加的溴麝香草酚蓝和甲-酚红作为酸碱指示剂,在酸性条件下均显著呈现黄色,而在碱性条件下,溴麝香草酚蓝会显蓝,甲-酚红则呈现紫红色。纤维二糖作为可发酵的碳源,在适宜的环境中也能够促进弧菌的代谢。与此同时,较高浓度的多粘菌素B和多粘菌素E能够有效抑制大多数革兰氏阴性菌的生长。因此,创伤弧菌能够在此培养基中较为顺利地生长,并通过对纤维二糖的分解产生酸,使得菌落呈现黄色,周围环境也因酸性产生变色。相比之下,其他不能利用纤维二糖的弧菌菌落通常呈现蓝绿色至紫红色。
二、培养基配方(g/L)
- 蛋白胨:100
- 月示胨:50
- 氯化钠:100
- 六水氯化镁:40
- 氯化钾:40
- 溴麝香草酚蓝:0.04
- 甲-酚红:0.04
- 琼脂:15.0
- 纤维二糖:15.0
- 多粘菌素B:40万IU
- 多粘菌素E:100万IU
pH:7.6 ± 0.1
三、使用方法
称取该培养基459.5g,加入900ml蒸馏水中加热煮沸使其溶解。分装并冷却至48-55℃左右时,每瓶90ml的培养基中加入无菌的10%纤维二糖溶液15ml和1支CPC琼脂添加剂(多粘菌素B 40000IU、多粘菌素E 100000IU),充分混匀后,倾入无菌平皿备用。
四、生长现象
在36±1℃下接种以下质控菌株并培养18-24小时,观察菌落生长情况。质控菌株及其生长情况如下一览:
- 创伤弧菌 ATCC 27562:生长良好,出现黄色菌落,并伴随周围变黄
- 霍-乱弧菌 CICC 23794:呈现蓝绿色至紫色菌落,周围变紫
- 大肠埃希氏菌 ATCC 25922:抑制创伤弧菌 ATCC 27562 的生长
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